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高效液相色谱仪色谱图异常怎么解决

更新时间:2018-06-02 13:37:18点击次数:198次字号:T|T
        高效液相色谱仪色谱图出现保留时间变化、保留时间缩短、保留时间延长、出现肩峰或分叉、峰拖尾和峰展宽等异常时,原因及处理方法如下: 一、保留时间变化:   1、柱温变化:配置柱恒温,必要时需配置恒温箱。   2、等度与梯度间未能充分平衡:至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱。   3、缓冲液容量不够:用大于 25 mmol/L 的缓冲液。   4、柱污染:每...

高效液相色谱仪色谱图出现保留时间变化、保留时间缩短、保留时间延长、出现肩峰或分叉、峰拖尾和峰展宽等异常时,原因及处理方法如下:

一、保留时间变化:

1、柱温变化:配置柱恒温,必要时需配置恒温箱。

2、等度与梯度间未能充分平衡:至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱。

3、缓冲液容量不够:用大于 25 mmol/L 的缓冲液。

4、柱污染:每天冲洗柱。

5、柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相。

6、柱快达到寿命:用保护柱。

二、保留时间缩短:

1、流速增加:检查泵,重新设定流速。

2、样品超载:降低样品量。

3、键合相流失:流动相 PH 值保持在 3~7.5。

4、流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀。

5、温度增加:柱恒温。

三、保留时间延长:

1、流速下降:管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡。

2、硅胶柱上活性点变化:用流动相改性剂(如三乙胺等)或碱致钝化柱。

3、键合相流失:流动相 PH 值保持在 3~7.5。

4、流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀。

5、温度降低:柱恒温。

四、出现肩峰或分叉:

1、样品体积过大:用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的 15%。

2、溶剂过强:用较弱的溶剂。

3、柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件。

4、柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品。

5、进样器损坏:更换进样器。

五、峰拖尾:

1、柱超载:降低样品量,增加柱直径,用较高容量的固定相。

2、峰干扰:清洁样品,调整流动相。

3、硅羟基作用:钝化样品。

4、死体积或柱外体积过大:连接点降至最低,对所有连接点作适当调整,尽可能采用细内径的连接管。

5、柱效下降:用较低腐蚀条件,更换柱,用保护柱。

六、峰展宽:

1、进样体积过大。

2、在进样阀中造成峰扩展:进样前后排出气泡以降低扩散。

3、数据系统采样速率太慢:设定速率应每峰大于 10 点。

4、检测器时间常数过大:设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的 10%。

5、流动相粘度过高:增加柱温,用低粘度流动相。

6、检测池体积过大:用小体积检测池,卸下热交换器。

7、柱外体积过大:将连接管径和连接管长度降至最小。

8、保留时间过长。

9、样品过载。

高效液相色谱仪





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