收藏本站|在线留言|联系我们|sitemap丨网站地图

奥普斯全国服务热线:

400-1158-566

行业新闻 >> 返回 您当前所在位置:首页 > 新闻中心 > 行业新闻 > 正文

高效液相色谱仪使用,操作必须注意的流动相要点

更新时间:2018-05-25 13:47:29点击次数:205次字号:T|T
流动相相当于液相的血液,在使用过程中会有各种需要注意的事项。其中有些“坑”千万要注意。 01 加入有机溶剂之后测量移动相酸碱度 如果你用有机添加剂测量pH值,得到的pH值会与添加有机溶剂之前的值不同。然而,最重要的一点是要保持一致。如果你总是在加入有机溶剂之后测量pH值,那么务必保证在使用的方法中陈述你的步骤,这样的话其他人就会按照统一方式进行。这种方式并不保证百分百准确,但是至少可以保持方法的前后统一。...

高效液相色谱仪操作注意

流动相相当于液相的血液,在使用过程中会有各种需要注意的事项。其中有些“坑”千万要注意。

01

加入有机溶剂之后测量移动相酸碱度

如果你用有机添加剂测量pH值,得到的pH值会与添加有机溶剂之前的值不同。然而,最重要的一点是要保持一致。如果你总是在加入有机溶剂之后测量pH值,那么务必保证在使用的方法中陈述你的步骤,这样的话其他人就会按照统一方式进行。这种方式并不保证百分百准确,但是至少可以保持方法的前后统一。这也许会比得到精准的pH值更加重要。

02

没有使用缓冲液


缓冲剂的作用就是用来控制PH值并阻止其发生变化。很多其他方法会改变流动相的PH值,会引起停留时间、峰形以及峰值响应的漂移。


03

甲酸、TFA等不是缓冲剂


04

没有在正常酸碱度范围内使用缓冲液

每个缓冲盐有2个pH单位范围宽度,在这个范围内可以提供稳定性最佳的pH值。窗口之外的缓冲盐不具备有效的抗pH值变化能力。要么在正确的范围内使用缓冲剂,要么选择一种缓冲剂可以涵盖你所需要的pH值。

05

向有机溶液中加缓冲液

将缓冲溶液与有机相混合,会极有可能引起缓冲液沉淀。在很多情况下,即使沉淀现象已经发生了,但仍很难被发现。记住,一定要将有机溶液加入到水相当中,这可以很好的降低缓冲液沉淀的几率。

06

从0%用泵混合浓度梯度

现在使用的泵可以有效的混合流动相并实现在线脱气,但并不是使用你的方法的任何人都会配有高质量的泵。将A和B混合到一个单独的溶液中,在100%线上运行。

比如说通过用50ml水混合制备有机950ml起始混合物。这样做的好处就是可以减少HPLC之间的可变性,减少系统中产生气泡和沉淀的可能性。值得注意的是泵混合液的比例是95:5并不代表瓶体的预混合保留时间也为95:5。

07

不要使用正确的改性酸(碱)改变缓冲液

只能使用形成你使用的缓冲盐的酸或碱。比如磷酸钠缓冲液应仅用磷酸或氢氧化钠调节。

没有在方法中阐述有关缓冲液的全部信息,比如说在1000ml的水中加入5g磷酸钠。

缓冲剂的类型决定了能够缓冲的PH范围。所需的浓度决定了缓冲强度。5克或无水磷酸钠和5克一水合物磷酸一钠具有不同的缓冲强度。

08

还没先检查就开始添加有机溶剂

如果上一个方法中基线B中使用过的是缓冲液,而你的方法中,基线B使用的是有机溶液,好在你可以沉淀泵管和泵头中的缓冲剂。

09

支起瓶体清空最后一滴

很有可能你没有足够的流动相完成整个操作,最后样品会冒烟的。除了可能存在烧干泵系统和柱子的可能性之外,流动相也会蒸发的一干二净,瓶体顶部的流动相会发生变化。

10

利用超声脱气的流动相

最重要的一点就是确保所有的缓冲盐已经溶解,但是这是一种效果最差的脱气方式,并且它会很快让流动相升温,从而引起有机成分蒸发掉。为了省去之后不必要的麻烦,请用五分钟时间使用真空过滤你的流动相。




您可能还喜欢

1、详细的:高效液相色谱法及分离条件
2、我是奥普斯液相色谱仪、我一点都不慌

3、高效液相色谱仪选型原则

4、高效液相色谱仪之检测仪器(选型、分类、使用)

5、高效液相色谱仪操作中常见的十几个问题,解决方法


实验室也关注的

1、实验室分析仪器之气相色谱仪的安装测试

2、专家告诉您气相色谱仪怎么操作使用及应用

3、实验室常用的食品检测仪的种类

4、实验分析仪器介绍、组成、原理

5、液相色谱仪流程图(原理)


最新气相、高效液相色谱仪报价


1、一张图告诉您一台高效液相色谱仪多少钱

2、2018年气相、液相色谱仪价格淘宝报价


进口国产气相、高效液相色谱仪品牌


1、国内外市场上常见的知名液相色谱仪品牌有哪些?

2、奥普斯与安捷伦、岛津、赛默飞四大高效液相色谱仪进口品牌

3、五大进口高效液相色谱仪品牌

4、年度十大最受网络媒体与网民关注的分析仪器品牌(排名不分先后)。




www.guodaxt.com (编辑:高效液相色谱仪)
<
分享到:QQ空间新浪微博腾讯微博人人网微信