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造成色谱峰(不对称)拖尾的原因

更新时间:2018-07-05 15:14:40点击次数:242次字号:T|T
造成色谱峰(不对称)拖尾的原因 1.色谱柱本身填装问题,筛板堵塞或填料塌陷; 2.柱头有污染; 3.样品超载; 4.样品溶剂不合适; 5.柱外效应; 6.化学或二次保留(硅羟基)效应; 7.缓冲容量不足或不合适; 8.重金属污染。 (3)如何解决峰形拖尾的问题 A.与化学有关的拖尾问题 1.流动相中,加入30mM的三乙胺(用与碱性化合物)或醋酸胺(用与酸性化合物),未知化合物加醋酸三乙胺; 2.如仍然拖尾,将三乙胺换为二甲基辛胺(或...

造成色谱峰(不对称)拖尾的原因

1.色谱柱本身填装问题,筛板堵塞或填料塌陷;
2.柱头有污染;
3.样品超载;
4.样品溶剂不合适;
5.柱外效应;
6.化学或二次保留(硅羟基)效应;
7.缓冲容量不足或不合适;
8.重金属污染。

(3)如何解决峰形拖尾的问题

A.与化学有关的拖尾问题
1.流动相中,加入30mM的三乙胺(用与碱性化合物)或醋酸胺(用与酸性化合物),未知化合物加醋酸三乙胺;
2.如仍然拖尾,将三乙胺换为二甲基辛胺(或醋酸二甲基辛胺);
3.降低进样量至<1ug。

B.与色谱柱有关的拖尾问题
1.如柱头处有强保留的样品组分积聚,反相柱可用20倍柱体积的96%的二碌甲烷与4%甲醇,加1%氢氧化铵混合液冲洗,正向柱可用甲醇冲洗。
2.使用保护柱。

C.与HPLC系统有关的峰拖尾和峰加宽
1.进样体积过大(通常≤25ul);
2.进样阀与色谱柱及检测器之间的管路体积过大(最佳连接管应<20cm,内径为0.007″);
3.检测器流通池的体积过大。

色谱柱

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